华西医学期刊出版社
关键词
  • 标题
  • 作者
  • 关键词
  • 摘要
高级搜索
高级搜索

搜索

找到 关键词 包含"成骨细胞" 68条结果
  • 表面含硅微弧氧化涂层镁合金ZK60体外与成骨细胞生物相容性的研究

    目的研究表面含硅微弧氧化(micro-arc oxidation,MAO)涂层镁合金ZK60体外与成骨细胞的生物相容性。 方法扫描电镜观察表面含硅MAO涂层镁合金ZK60的表面形貌,并用能谱分析仪检测涂层元素组成。实验分为表面含硅MAO涂层镁合金ZK60组(A组)、无涂层镁合金ZK60组(B组)、医用钛合金组(C组)及空白对照组(D组)。取A、B、C组对应材料按照ISO 10993-12标准(试样表面积/浸体介质= 1.25 cm2/mL)分别制备材料浸提液并培养小鼠前成骨细胞MC3T3-El,D组采用含10%FBS的α-MEM培养基进行培养。倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖活力,并检测成骨细胞ALP表达活性。扫描电镜观察A、B、C组材料表面细胞黏附形态,检测涂层表面的蛋白吸附能力,采用DAPI观察细胞早期黏附情况,钙黄绿素/乙锭均二聚物1(calcein-AM/ethidium homodimer 1,calcein- AM/ EthD- 1)双重染色观察细胞生长状态。 结果扫描电镜下见表面含硅MAO涂层镁合金ZK60呈粗糙、多孔表面形态,涂层的主要组成元素为Mg、O和Si。材料浸提液培养后各组细胞轮廓清晰、形态良好,其中A组细胞伸展性更好。培养5 d时,MTT检测示A组细胞增殖活力明显高于其他组(P lt; 0.05)。扫描电镜观察见A、C组材料表面细胞伸展性良好,优于B组,且A组细胞与材料表面黏附更紧密。A组材料表面蛋白吸附量为(152.7 ± 6.3)µg/mL,明显高于B、C组的(96.3 ± 3.9)、(96.1 ± 8.7) µg/ mL(P lt; 0.05);各时间点A组细胞黏附数量均明显高于B、C组(P lt; 0.05)。calcein-AM/EthD-1双染观察见A、C组材料表面细胞生长状态优于B组。 A、B组ALP表达分别为15.55 ± 0.29和13.75 ± 0.44,明显高于C、D组的10.43 ± 0.79和10.73 ± 0.47(P lt; 0.05),且A组高于B组(P lt; 0.05)。 结论表面含硅MAO涂层镁合金ZK60可促进成骨细胞增殖、黏附及分化,具有良好生物相容性,是一种较理想的镁合金表面改性方法。

    发表时间:2016-08-31 04:07 导出 下载 收藏 扫码
  • 微小RNA对成骨细胞分化成熟的调控及临床意义

    目的 总结微小RNA(microRNA,miRNA)在成骨细胞分化成熟过程中的调控作用及作用机制,为相关的基础和临床研究提供参考。 方法 广泛查阅近年miRNA 对成骨分化调节相关研究文献,对成骨细胞分化成熟过程中的功能性miRNA 进行分类和总结。 结果 miRNA 分子参与了成骨细胞分化成熟过程中的各个阶段,通过调节BMP、TGF-β、Wnt/β-catenin 等一系列信号通路调控成骨细胞的分化成熟。在病理状况下,尤其是一些成骨细胞分化紊乱引起的疾病中能观察到相关miRNA 分子的异常表达。 结论 miRNA 在成骨细胞分化成熟过程中的生理病理作用将为骨代谢相关疾病的早期诊断和靶向治疗提供新的思路和手段。

    发表时间:2016-08-31 04:23 导出 下载 收藏 扫码
  • 信号选择性甲状旁腺素模拟肽成骨效应的Wnt 信号通路研究

    目的 探讨信号选择性甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)模拟肽在促进小鼠成骨细胞成骨过程中对Wnt 信号传导通路相关因子的影响,研究其成骨的作用机制。 方法 取2 ~ 3 日龄C57BL 乳鼠颅盖分离培养成骨细胞,倒置相差显微镜观察形态变化,ALP 染色和茜素红染色对成骨细胞进行鉴定。取贴壁生长的第1 代细胞,随机分为4 组:PTH(1-34)组、G1R19(1-34)组和G1R19(1-28)组分别加入10 nmol/L PTH(1-34)、10 nmol/L G1R19(1-34)、100 nmol/L G1R19(1-28),空白对照组加入等体积的0.1% 三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)。实时定量PCR 法检测Wnt 信号通路相关基因β-catenin、骨钙素(osteocalcin,OC)、Wnt2、Wnt5b、Wnt7b 基因的表达。 结果 倒置相差显微镜观察示,培养7 d 可见细胞排列紧密,为三角形或多边形,呈铺路石样;细胞培养14 d ALP 染色可见细胞质中出现蓝染颗粒,成骨诱导培养28 d 茜素红染色可见细胞外基质中红色矿化结节形成。实时定量PCR 检测发现,各处理组OC、Wnt5b mRNA 相对表达量均高于空白对照组,Wnt2 mRNA 相对表达量均低于空白对照组;PTH(1-34)组、G1R19(1-34)组Wnt7b mRNA 相对表达量高于空白对照组,G1R1(9 1-34)组高于PTH(1-34)组和G1R1(9 1-28)组;PTH(1-34)组β-cateninmRNA 相对表达量显著高于空白对照组;以上差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。其余各因子mRNA 表达各组间比较差异均无统计学意义(P gt; 0.05)。 结论 在所检测的Wnt 相关因子中,PTH(1-34)和G1R19(1-34)对经典Wnt 信号因子作用明显,G1R19(1-28)对非经典Wnt 信号因子作用明显。

    发表时间:2016-08-31 04:23 导出 下载 收藏 扫码
  • 金属离子对成骨细胞凋亡、细胞周期分布及ALP 分泌的影响

    目的 金属磨损产物对人工关节的无菌性松动有影响,通过观察Co2+、Cr3+ 对小鼠成骨细胞凋亡、细胞周期以及在离子刺激下对成骨细胞分泌ALP 的影响,为防治人工关节置换术后假体周围骨溶解提供实验依据。 方 法 体外培养小鼠颅骨成骨细胞MC3T3-E1 至第3 ~ 5 代,调整细胞密度至5 × 105 个/mL,根据干预方法不同将细胞分为两组。实验组:成骨细胞于含10%FBS 的α-MEM 培养基中培养,待细胞完全贴壁后,加入CoCl2 与CrCl3 混合溶液;对照组:成骨细胞于含10%FBS 的α-MEM 培养基中培养。于培养12、24、48 h 后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布,ELISA 法检测培养上清液中ALP 含量。 结果 培养12、24、48 h,实验组凋亡率分别为13.90% ± 0.52%、14.80% ± 0.41%、13.40% ± 0.26%,对照组分别为8.56% ± 0.31%、8.19% ± 0.24%、2.15% ± 0.11%,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。各时间点实验组细胞G2M期分布比例明显较对照组降低,G0G1 期分布比例较对照组增多,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。培养12、24、48 h,实验组ALP 含量检测吸光度(A)值分别为0.955 ± 0.052、0.624 ± 0.041、0.498 ± 0.026,对照组分别为1.664 ± 0.041、1.986 ± 0.024、2.192 ± 0.041,两组比较差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。 结论 Co2+、Cr3+ 对成骨细胞的细胞周期分布有明显影响,抑制其增殖,使细胞大部分处于G0G1 期,同时增加其凋亡率,抑制成骨细胞释放ALP。

    发表时间:2016-08-31 05:41 导出 下载 收藏 扫码
  • 新型硼酸盐生物玻璃对成骨细胞行为影响的体外研究

    目的 硼酸盐生物玻璃具有较高的化学反应活性,可以诱导骨再生。通过调整配方构建新型硼酸盐生物玻璃,探讨其对体外培养成骨细胞行为的影响,为其下一步的体内研究及临床应用奠定实验基础。 方法 采用熔融法制备Na2O-K2O-MgO-CaO-P2O5-B2O3-SrO 新型硼酸盐生物玻璃。并根据ISO10993-12:2007 的要求制备材料初次浸提液及二次浸提液。取体外培养第5 ~ 15 代MC3T3-E1 细胞,分别与初次浸提液、二次浸提液共培养,以α-MEM 培养基为对照。观察新型硼酸盐生物玻璃对成骨细胞增殖率、蛋白合成、ALP 活性、细胞凋亡以及细胞横向、纵向迁移的影响。 结 果 初次浸提液组、二次浸提液组与对照组成骨细胞增殖吸光度A 值分别为0.356 0 ± 0.018 7、0.331 0 ± 0.025 4、0.204 0 ± 0.013 8,各组间比较差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。初次浸提液组、二次浸提液组与对照组总蛋白含量分别为(382.847 ± 9.521)、(226.071 ± 5.847)、(220.248 ± 8.213)U,初次浸提液组与对照组、二次浸提液组比较,差异均有统计学意义(P lt; 0.05),但二次浸提液组与对照组比较,差异无统计学意义(P gt; 0.05)。初次浸提液组、二次浸提液组及对照组ALP 活性分别为(0.013 01 ± 0.000 39)、(0.012 93 ± 0.000 44)、(0.012 92 ± 0.000 35)U/mg;细胞凋亡率分别为7.03% ± 1.95%、6.46% ± 2.88%、6.18% ± 2.21%;细胞横向迁移距离分别为(137.50 ± 11.43)、(134.98 ± 10.50)、(135.21 ± 8.66) μm;Transwell 中穿膜细胞数分别为(10.92 ± 4.99)、(10.07 ± 2.50)、(9.81 ± 2.64)个/ 视野;以上指标3 组间两两比较差异均无统计学意义(P gt; 0.05)。 结论 新型硼酸盐生物玻璃具有良好的成骨细胞相容性,对细胞增殖、分泌、迁移等行为均有一定调节作用。

    发表时间:2016-08-31 05:44 导出 下载 收藏 扫码
  • 微小RNAs 在骨与软骨组织中的调节作用

    目的 对微小RNAs(microRNAs,miRNAs)在骨与软骨组织中的调控作用和作用机制作一综述。 方 法 广泛查阅近年来有关miRNAs 在骨与软骨组织的调控作用及作用机制的文献,进行总结与分析。 结 果 miRNAs 是近年来骨关节疾病研究的热点,越来越多研究显示其在骨与软骨组织形成和代谢过程中,对于细胞分化、细胞基质分泌等方面发挥重要的调控作用,但确切机制尚不清楚。 结论 通过对miRNAs 在骨与软骨组织中的调控作用及作用机制的研究,可能为了解退行性骨关节疾病开辟新的领域。

    发表时间:2016-08-31 05:44 导出 下载 收藏 扫码
  • hBMP-7 基因在脂肪源性干细胞中的表达及对其向成骨细胞分化的影响

    目的 构建hBMP-7 基因真核表达载体,观察其在兔脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)的表达,并观察其对ADSCs 向成骨细胞分化的影响。 方法 3 月龄清洁级健康日本大耳白兔,雌雄不限,体重3 ~ 4 kg。取兔皮下脂肪约5 mL,采用胶原酶消化离心贴壁培养法培养 ADSCs,取第3 代细胞进行实验;CD44、CD49d、CD106 免疫荧光染色鉴定ADSCs。构建真核表达载体pcDNA3.1-hBMP-7,经鉴定后利用LipofectamineTM 2000 介导转染ADSCs,免疫组织化学染色检测hBMP-7 在ADSCs 中的表达;ALP 定量测定、Ⅰ型胶原免疫荧光检测hBMP-7 基因转染对ADSCs 向成骨细胞分化的影响。 结果 倒置相差显微镜观察示ADSCs 呈梭形、多角形分布;表面抗原标志CD44、CD49d 呈阳性表达,CD106 呈阴性表达。成功构建pcDNA3.1-hBMP-7 真核表达载体,并利用脂质体介导的方法成功导入ADSCs 中,免疫组织化学染色提示hBMP-7 能在ADSCs 中表达。ALP 定量测定示,转染后7、10、14 d pcDNA3.1-hBMP-7 转染组(实验组)ALP 活性明显高于pcDNA3.1 空载体转染组(对照组),差异有统计意义(P lt; 0.05);转染后7、14 d,实验组Ⅰ型胶原表达量均高于对照组(P lt; 0.05)。 结论 构建的真核表达载体pcDNA3.1-hBMP-7 可在兔ADSCs中表达,且转染后的ADSCs ALP 定量测定、成骨标志物Ⅰ型胶原的表达均高于pcDNA3.1 空载体转染细胞,为开展以干细胞为载体的局部基因治疗奠定了基础。

    发表时间:2016-08-31 05:44 导出 下载 收藏 扫码
  • 金属离子刺激小鼠成骨细胞骨保护素及其配体表达的实验研究

    目的 在人工全髋关节翻修术中发现假体周围大量金属离子聚集和NF-κB 受体活化因子配体(re ceptor activator of NF-κB ligand,RANKL)表达的增加,通过观察Co2+、Cr3+ 对小鼠成骨细胞RANKL、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达的影响,探讨金属离子与假体无菌性松动关系。 方法 取浓度为1 × 105 个 /mL 体外培养的小鼠成骨细胞,根据培养基不同分两组:实验组采用含10 mg/L CoCl2 及150 mg/L CrCl3 溶液的培养基;对照组采用不含金属离子的培养基。培养24、48 h,采用RT-PCR 和ELISA 法检测RANKL、OPG mRNA 及蛋白表达。 结 果 RT-PCR 检测示培养24、48 h 两组均见RANKL、OPG mRNA 的表达,实验组表达量较对照组高,以RANKL 增加显著,差异有统计学意义(P lt; 0.05);培养24、48 h,实验组RANKL/OPG mRNA 的比值分别为0.860、1.232,较对照组0.695、0.688 明显增加,差异有统计学意义(P lt; 0.05)。ELISA 检测显示,实验组RANKL、OPG 蛋白表达量较对照组明显增多,差异有统计学意义(P lt; 0.05)。 结论 Co2+、Cr3+ 可刺激小鼠成骨细胞RANKL、OPG mRNA 的表达并促进其蛋白的分泌,以RANKL 增加显著,从而促进破骨细胞的形成与活化以及假体无菌性松动的发生。

    发表时间:2016-08-31 05:47 导出 下载 收藏 扫码
  • 成骨细胞条件培养液对BMSCs 诱导分化作用研究

    目的 探讨大鼠成骨细胞条件培养液对同种大鼠BMSCs 的成骨诱导分化作用,为骨组织工程种子细胞的获得寻找一种新方法。 方法 健康1 周龄SD 大鼠10 只,雌雄不限,体重20 ~ 30 g,采用贴壁法和酶消化法分别获得BMSCs 和成骨细胞,并进行鉴定。无菌条件收集第1 ~ 5 代成骨细胞培养液上清,与完全培养基1 ∶ 1 混合,制备成骨细胞条件培养液,与第2 代BMSCs 共培养为诱导组,相同代次BMSCs 与完全培养液共培养为对照组。倒置相差显微镜下观察共培养后BMSCs 形态变化,MTT 法检测BMSCs 生长情况,免疫组织化学染色检测共培养后BMSCs 的ALP、Col Ⅰ、骨钙素(osteocalcin,OCN)蛋白的表达,采用 RT-PCR 检测Col Ⅰ、OCN mRNA 的表达。 结果 诱导组共培养7 d BMSCs 体积变大,细胞由长梭形展开为扁平形和多边形,并带有突起;9 d 细胞呈集落状生长。细胞生长曲线示BMSCs 数量随培养时间延长而增加,对照组增殖能力较诱导组强;诱导培养4 ~ 7 d,对照组细胞数量与诱导组比较差异有统计学意义(P lt; 0.05)。诱导组培养12 d,ALP 染色呈阳性表达;18 d 出现钙结节;21 d Col Ⅰ和OCN 呈阳性表达;对照组均呈阴性表达。RT-PCR 检测示诱导组培养21 d 有Col Ⅰ、OCN mRNA 表达,对照组未见表达。 结论 体外大鼠成骨细胞条件培养液有明显的诱导同种大鼠BMSCs 向成骨样细胞分化的作用。

    发表时间:2016-09-01 09:05 导出 下载 收藏 扫码
  • 成骨过程中微小RNAs 调控作用的研究进展

    目的 对微小RNAs(microRNAs,miRNAs)在成骨过程中的调控作用及作用机制的研究现状、存在的争议以及研究方向作一综述。 方法 广泛查阅近年来有关成骨过程中miRNAs 的调控作用及作用机制的文献,进行总结与分析。 结果 miRNAs 是近来成骨研究的热点,越来越多资料显示其在骨化过程中发挥重要作用,但确切机制尚未清楚。 结论 通过应用miRNAs 技术促进成骨细胞分化,具有巨大的应用前景,同时将可能获取成骨细胞分化中的miRNAs 调控机制,也有利于建立成骨效果比较的研究模型。

    发表时间:2016-09-01 09:05 导出 下载 收藏 扫码
共7页 上一页 1 2 3 ... 7 下一页

Format

Content